緑茶還元金ナノ粒子の形状依存的細胞毒性と細胞取り込み：がん細胞での評価

概要

本報告では、キトサン修飾した3形状の金ナノ粒子（ナノスフィア、ナノスター、ナノロッド）を合成し、形状ががん細胞での細胞毒性と細胞取り込みに及ぼす影響を調査した。緑茶抽出物を還元剤として金塩からナノスフィアを合成。ナノスターは調製済みナノスフィア溶液をシード溶液として作製。ナノロッドは従来法で合成。全3形状がUV-Vis分光で特徴的な表面プラズモン共鳴（SPR）バンドを示した。高分解能透過型電子顕微鏡（HR-TEM）像で全形状に格子構造が明確に観察され、結晶性を確認。全3コロイド溶液が様々な溶液でコロイド安定性を保持。細胞毒性評価にはMTTアッセイを4種類のがん細胞株で実施。細胞毒性はナノロッド＞ナノスター＞ナノスフィアの順で高かった。ヒト肝細胞癌細胞（HepG2）での金ナノ粒子細胞取り込み量はナノスフィア＞ナノロッド＞ナノスターの順。本研究成果は、ナノメディシン分野での薬物送達担体としての金ナノ粒子形状設計の指針となり得る。

はじめに

植物にはフラボノイド、サポニン、アルカロイド、ステロイド、クマリン、タンニン、フェノール、テルペノイド、炭水化物、タンパク質、アミノ酸など天然の一次・二次代謝産物が含まれる。近年、植物抽出物が金、銀、酸化チタン、銅、パラジウム、酸化亜鉛、白金ナノ粒子など金属ナノ粒子合成の還元剤として利用されている[1]。多様な植物化学物質が金属塩を金属ナノ粒子に変換する還元剤として積極的に参加し、さらに植物抽出物はコロイド安定性維持の安定化剤としても機能する。化学還元剤は一般に生物毒性が高いが、植物抽出物利用はグリーン、エコフレンドリー、持続可能である。茎、果実、種子、葉、花など様々な植物部位が金属ナノ粒子合成に用いられる[1, 2]。植物抽出物を還元剤とする金ナノ粒子（AuNPs）グリーン合成の広範なレビューがある[2-4]。このグリーン戦略では合成工程がワンポット・ワンステップで完結し、簡便、容易、低コスト、環境調和的である。AuNPsのサイズ、形状、形態は金塩と抽出物濃度、反応時間、温度、溶液pHに依存する。UV-Vis分光、X線回折、フーリエ変換赤外分光（FT-IR）、透過型電子顕微鏡（TEM）、原子間力顕微鏡（AFM）、走査型電子顕微鏡（SEM）、動的光散乱（DLS）とゼータ電位測定などでキャラクタリゼーションを行う。これらグリーンAuNPsは触媒、抗酸化、抗菌、抗がん剤として応用される[5-8]。

著者らの研究室では、ヨモギ（Artemisia capillaris）、メハジキ（Leonurus japonicus）、オンジ（Polygala tenuifolia）、スオウ（Caesalpinia sappan）、サイコ（Bupleurum falcatum）、マンゴスチン（Garcinia mangostana）抽出物を還元剤としてAuNPsと銀ナノ粒子（AgNPs）をグリーン合成してきた[9-18]。ヨモギ地上部抽出物でAgNPsとAuNPs合成[9, 15, 16]。調製AgNPsは抽出物単独より大腸菌、エンテロバクター・クロアカエ、緑膿菌、クレブシエラ・アエロゲネス、クレブシエラ・オキシトカに優れた抗菌活性[15]。セチルトリメチルアンモニウムブロミド共存下のヨモギ合成AgNPsがメチシリン耐性黄色ブドウ球菌（MRSA）に抗菌活性[16]。ヨモギ合成AuNPsが4-ニトロフェノール還元反応に触媒活性[9]。メハジキ抽出物AgNPsで顕著な抗菌活性向上[10]。グラム陰性菌への抗菌活性が陽性菌より高い傾向。オンジ根抽出物でAuNPsとAgNPs合成[11, 17]。オンジ合成AuNPsで抗凝固活性増強、AgNPsで抗菌活性増強。最も興味深くはスオウ抽出物AgNPsがMRSAに有効[18]。マンゴスチン抽出物で非対称ダンベル形AgNPs作製、アポトーシス効果[14]。

茶葉抽出物を用いたAuNPsとAgNPsグリーン合成の先行報告[19-23]。Kamalらは25 nm AgNPs合成成功[19]。別報告で茶葉抽出物で20–90 nm球状AgNPs合成、大腸菌にわずかな抗菌活性[20]。Looらは3.42–4.06 nm球状AgNPs合成[21]。Vaseeharanらが茶葉抽出物抗菌AgNPs合成[22]、病原性Vibrio harveyi感染に有効。Begumらが紅茶葉抽出物でAuNPsとAgNPs両方合成[23]。これまで茶葉抽出物では主に球状AgNPsが合成されてきた。

本報告ではAuNPsキャッピング剤としてキトサンを使用。キトサンは高生体適合性、低アレルギー性、生分解性、低毒性で薬物/遺伝子送達担体として探索されてきた[24-26]。キトサンはカニ、ロブスター、エビなど甲殻類外骨格に豊富なキチンに由来。キチンはN-アセチル-D-グルコサミンがβ(1-4)グリコシド結合で連なった多糖類。キトサンはキチンの不均一N-脱アセチル化で得られる。キトサン自体が抗菌、抗真菌、抗腫瘍、抗酸化活性を持つ[25]。キャッピング剤としてキトサンは静電立体機構でAuNPsと直接接触[26]。キトサンナノ粒子はA549細胞の細胞取り込み機構に影響するが細胞毒性は変えない[24]。さらにキトサン脱アセチル化度が分子量より細胞取り込みと細胞毒性に影響大[24]。

本報告では緑茶葉抽出物で金ナノスフィアとナノスターを合成。ナノスフィアをシードとしてナノスターをシード媒介合成。比較用にナノロッドを従来法[27]で合成。3形状AuNPs（ナノスフィア、ナノスター、ナノロッド）をキトサンキャッピングし生体適合性とコロイド安定性向上。UV-Vis分光、HR-TEM、FT-IRでキャラクタリゼーション。DLSによる動的光散乱とゼータ電位測定をキトサンキャッピング前後で実施。食塩水、緩衝液、培地でのコロイド安定性評価。細胞毒性はMTTアッセイで4がん細胞：AGS（ヒト胃腺癌）、HeLa（ヒト子宮頸上皮癌）、HepG2（ヒト肝細胞癌）、HT29（ヒト大腸腺癌）に実施。HepG2細胞でのAuNPs細胞取り込みを誘導結合プラズマ発光分光分析（ICP-OES）とレーザーアブレーション誘導結合プラズマ質量分析（LA-ICP-MS）で定量測定。

材料と方法

材料と機器

クロロ金酸三水和物（HAuCl₄·3H₂O）、セチルトリメチルアンモニウムブロミド（CTAB）、キトサン（エビ由来、≥75%脱アセチル化）、3-(4,5-ジメチルチアゾール-2-イル)-2,5-ジフェニルテトラゾリウムブロミドをSigma-Aldrich（米国ミズーリ州セントルイス）から購入。その他試薬は分析級。Shimadzu UV-1800またはUV-2600分光光度計で石英セル（Shimadzu、京都）用い300–800 nm範囲でUV-Visスペクトル取得。DLSによる動的光散乱とゼータ電位測定はNanoBrook 90Plus Zeta（Brookhaven Instruments、米国ニューヨーク）で実施。Varian 640 IR（Agilent Technologies、米国カリフォルニア州サンタクララ）でKBr錠剤法でFT-IRスペクトル取得。HR-TEM像はJEM-3010（JEOL、東京）300 kVで撮影。試料はカーボンコート銅グリッド（カーボンタイプB、300メッシュ、Ted Pella、米国カリフォルニア州レディング）に載せ、37°Cで24時間オーブン乾燥。超音波洗浄はWUC-A22H（Daihan Scientific、韓国ソウル）使用。遠心分離はCentrifuge 5424R（Eppendorf AG、ドイツハンブルグ）、凍結乾燥はFD8518（IlshinBioBase、韓国京畿道）使用。AuNPs細胞取り込みにはOptima 8300 ICP-OES（PerkinElmer、米国マサチューセッツ州ウォルサム）とJ200 Tandem LA-ICP-MS（Applied Spectra、米国カリフォルニア州フリモント）使用。

緑茶抽出物調製

緑茶研究所（韓国慶尚南道ハドン）より乾燥緑茶葉を提供。ブレンダーで粉末化。脱イオン水2 Lと粉末葉200 gを混合抽出。室温で超音波照射1時間を3回繰り返し抽出実施。ろ紙で水溶画分をろ過し不溶物除去。遠心分離（3,000g、18°C、25分）、上清回収。シリンジフィルターろ過、濾液を凍結乾燥。凍結乾燥物を脱イオン水に溶解し、最終濃度2%（w/v）ストック溶液を作製し以降のグリーン合成に使用。

抽出物を用いた金ナノスフィア合成

ナノスフィア合成プロセスを図1aに示す。前節ストック溶液を使用。ガラスバイアルに抽出物（最終濃度0.03%）とクロロ金酸三水和物（最終濃度0.5 mM）を混合、水酸化ナトリウム（最終濃度1 mM）添加。脱イオン水で最終体積2 mLに調整。乾燥オーブンで80°C、2時間インキュベート。ナノスフィアの表面プラズモン共鳴（SPR）を300–800 nm範囲でUV-Visスペクトル取得しモニタリング。このナノスフィアを次節ナノスター合成のシードとして使用。

金ナノスター合成

ナノスター合成プロセスを図2aに示す。前節合成ナノスフィア（50 µL）を磁気撹拌子で750 rpm、室温で撹拌。クロロ金酸三水和物（0.25 mM、5 mL）添加。15秒後、硝酸銀（1 mM、50 µL）とアスコルビン酸（鮮製、100 mM、25 µL）を同時添加。750 rpmで5分撹拌継続。300–1100 nm範囲でUV-Visスペクトル取得。

金ナノロッド合成

ナノロッド合成プロセスを図3aに示す。先行報告[27]に従いシード媒介合成を微修正で実施。成長溶液調製：20 mLガラスバイアルにクロロ金酸三水和物（10 mM、500 µL）とCTAB（100 mM、9.5 mL）混合。溶液は黄褐色。アスコルビン酸（鮮製、100 mM、55 µL）添加し、黄褐色から無色へ変わるまで撹拌。硝酸銀（10 mM、100 µL）添加し10秒振盪。これを成長溶液とラベル。シード溶液調製：別20 mLガラスバイアルにクロロ金酸三水和物（10 mM、250 µL）とCTAB（100 mM、9.75 mL）混合。氷冷鮮製ホウ化ナトリウム（10 mM、600 µL）添加し2分ボルテックス。これをシード溶液とラベル。シード溶液（12 µL）を先行調製成長溶液に混合。400–900 nm範囲でUV-Visスペクトル取得。

ナノスフィア、ナノスター、ナノロッドのキトサンキャッピング

AuNPsのコロイド安定性と生体適合性向上のためキトサンキャッピング実施。キトサンを1%酢酸に溶解、最終濃度0.01%に調整。超音波処理でキトサン完全溶解、この溶液をキトサンキャッピング用ストック溶液とする。先行合成ナノスフィアとナノスターをキトサンストック溶液（0.01%）でキャッピング。キトサンストック溶液（30%、v/v）とAuNP溶液（70%、v/v）混合、900 rpmで2時間撹拌しキャッピング完了。ナノロッドは過剰CTAB使用のため、遠心分離（14,000 rpm、15分、25°C）でCTAB除去。ペレットからナノロッド回収し、上記同様にキトサンキャッピング実施。その後UV-Visスペクトル取得。

コロイド安定性評価

ナノ粒子コロイド安定性はin vitro/in vivo応用で重要。キトサンキャッピング済み3形状AuNPsとキトサンキャッピングなしナノスフィアを以下溶液で評価：(i)脱イオン水、(ii)5% NaCl、(iii)PBS（pH 7.4）、(iv)5% BSA、(v)DMEM、(vi)完全培地（DMEM+10% FBS）。各AuNP溶液1 mLを各試験液（0.5 mL）と混合、25°Cで30分インキュベート後UV-Visスペクトル取得。

細胞培養と細胞毒性

韓国細胞バンク（ソウル）よりAGS、HeLa、HepG2、HT29がん細胞株購入。MTTアッセイでAuNPsのin vitro細胞毒性評価。ナトリウムピルビン酸含有DMEM使用。培地：10% FBS、2 mM L-グルタミン、1%ペニシリン（100 U/mL）、ストレプトマイシン（100 U/mL）。100 mm培養皿で約70%コンフルエンス維持。細胞培養前、3形状AuNPsを真空蒸発で最終Au濃度5 mMに調整。96ウェルプレートに5.0×10³ cells/well播種、37°C、5% CO₂で24時間培養。AuNPs 5濃度（500、250、125、62.5、31.25 µM）処理、さらに24時間培養。MTT試薬（5 µL、5%水溶液）添加、37°C、5% CO₂で3時間インキュベート。570 nm吸光度測定（Synergy HT、BioTek、米国バーモント州ウィノスキ）。未処理細胞を対照とした。

細胞取り込み

HepG2細胞で各AuNP細胞取り込みを定量測定。24ウェルプレートに5.0×10⁴ cells/well播種、37°C、5% CO₂で24時間培養。各AuNP溶液5 µM（最終濃度）処理、さらに24時間培養。過剰AuNPs含む溶液除去、トリプシン処理で細胞回収。トリプシン化細胞中Au濃度をICP-OESとLA-ICP-MSで定量分析し、細胞内Au取り込み濃度を取得。対照として各AuNP元コロイド溶液5 µMもICP-OESとLA-ICP-MSで分析しAu濃度取得。

結果と考察

UV-Visスペクトル

UV-VisスペクトルはAuNPs合成確認に常用。AuNPs特徴的SPRは可視-近赤外域で観察。AuNPsキャッピングは一般にバトクロミック（赤方）またはヒプソクロミック（青方）シフトを誘起、ヒポクロミックシフト（吸光度低下）を伴うことが多い。図1bに300–800 nm範囲でモニタリングしたスペクトル示す。ナノスフィアは532 nm特徴的SPR、濃いワインレッド色。キトサンキャッピング後、最大SPRが537 nmへ赤方シフト、ヒポクロミックシフト伴う（図1b）。ナノスターは幅広SPR波長域（600–800 nm）、濃青色溶液（図2b）。キトサンキャッピングでヒポクロミックシフト、吸光度がキャッピングなしより低下（図2b）。ナノロッドは514 nmと815 nmの2明確SPR、薄ピンク色溶液（図3b）。キトサンキャッピングで797 nmへ青方シフト、ヒポクロミックシフト伴う（図3b）。これら結果からキトサンキャッピングがSPR波長変更とシフト誘起することを確認。UV-Visスペクトル精査で3形状AuNPsがキトサンで成功裏にキャッピングされたことを確認。

動的光散乱サイズとゼータ電位

動的光散乱サイズとゼータ電位測定結果を表1に示す。キトサンキャッピングなしでナノスフィア28.4 nm、ナノスター97.8 nm。ナノロッドは球形粒子想定のDLSでは測定困難。キトサンキャッピング後、ナノスフィア190.7 nm、ナノスター123.9 nmへ動的光散乱サイズ増大。サイズ増大でキャッピング確認。ゼータ電位変化もAuNPs表面キトサンキャッピング反映。キトサンは陽性多糖類で、キャッピング後全3形状で陽性ゼータ電位。ナノスフィア：−12.73 mVから42.28 mVへ変化。ナノスター：−42.46 mVから47.44 mVへ変化。ナノロッド：CTAB（陽性界面活性剤）使用でキャッピング前27.96 mV、キャッピング後33.23 mVへ増大。ナノスフィアとナノスターで陰性から陽性への変化がキトサンキャッピング成功を明確に示す。ナノロッドもゼータ電位上昇で表面キトサンキャッピング示唆。

HR-TEM像

顕微鏡はナノ粒子研究の要で、サイズと形状の本質的情報提供。分散状態、2D/3D形態・形貌、相対的柔らかさ/硬さなど詳細情報取得可能。ナノスフィアはHR-TEM像でランダム選択75粒子平均8.7±1.7 nm（図4）。最頻サイズ8–9 nm（29.3%）、次9–10 nm（12.0%）。キトサンキャッピング後も形状保持、形態変化なし（図4c,d）。結晶性は格子縞で明確確認（図4d）。隣接格子間距離0.24 nm測定（図4d）。キトサン層も可視化（図4d赤矢印）。ナノスターHR-TEM像（図5）。19粒子平均99.0±47.0 nm。格子構造拡大像で確認（図5c）、隣接格子間距離0.24 nm（図5c）。キトサン層赤矢印（図5c）。ナノロッドHR-TEM像（図6）。28粒子測定で平均長60.4 nm、幅16.4 nm。アスペクト比（長/幅）3.7。格子構造確認（図6c）、結晶性確認。隣接格子間距離0.23 nm（図6c）。キトサン層赤矢印（図6c）。

FT-IRスペクトル

緑茶には多様な一次・二次代謝産物含有。主要成分はポリフェノール：エピガロカテキン-3-ガレート、(-)-エピカテキン-3-ガレート、(-)-エピガロカテキン、(-)-エピカテキン[28]。FT-IRスペクトル取得でAuNPs合成に寄与した官能基情報取得。ナノスフィアスペクトルと抽出物スペクトル比較（図7）。還元反応に最関与可能な官能基は-OH。抽出物で-OHが3255 cm⁻¹に出現（図7a）。合成後このピークが3300–3341 cm⁻¹の高波数側へシフト。これはポリフェノール由来-OHが酸化されC=Oとなりながら金塩をAuNPsへ還元したことを示唆。特筆すべきはナノスフィアで1716 cm⁻¹にC=O官能基出現、合成中の-OH酸化を明確に裏付け（図7b）。

様々な溶液でのコロイド安定性評価

ナノ粒子コロイド安定性は診断・治療応用で重要。6溶液で評価：(i)脱イオン水、(ii)5% NaCl、(iii)PBS（pH 7.4）、(iv)5% BSA、(v)DMEM、(vi)完全培地（DMEM+10% FBS）。各AuNPsと試験液混合後UV-Visスペクトル取得、結果を表2と図8に示す。全3形状AuNPsでヒポクロミックシフトとわずかな赤方/青方シフト観察（図8a,c,e）。スペクトル形状保持、コロイド凝集なし（図8b,d,f）。以上よりコロイド安定性が上記試験液で良好に保持されること実証。

表2ではヒポクロミックシフトを元溶液吸光度100%とした保持率%で表現。全3 AuNPsで完全培地（後続細胞毒性実験使用）で最良安定性：ナノスフィア（65.3%）、ナノスター（93.4%）、ナノロッド（80.2%）。タンパク質溶液BSA（5%）でも良好：ナノスフィア（61.8%）、ナノスター（70.2%）、ナノロッド（72.0%）。これら結果はキトサンキャッピングとともにタンパク質被覆がAuNPsコロイド安定性にさらなる好影響を与えることを示唆。キトサンキャッピングなしナノスフィアも評価（図8g,h）。全溶液でヒポクロミックシフト誘起。試験溶液中、NaCl（5%）のみ大幅赤方シフトとヒポクロミックシフト併発。

細胞毒性

MTTアッセイで4がん細胞種（図9：AGS、HeLa、HepG2、HT29）への細胞毒性測定。全3形状AuNPs細胞毒性はAu濃度依存。4細胞種中HepG2で最高細胞毒性観察。さらにナノロッド＞ナノスター＞ナノスフィアの順で4細胞種全てで毒性高い。ナノロッドは極めて高毒性のため、低Au濃度域（8–125 µM）でも評価（図9e）。8 µM Au濃度でも濃度依存的細胞毒性示す。HepG2対IC₅₀値：ナノスフィア127.1 µM Au、ナノスター81.8 µM Au、ナノロッド22.7 µM Au。したがってHepG2ではナノロッド最毒性、次ナノスター、ナノスフィア最低毒性。

AuNPs細胞毒性はサイズ、形状、表面電荷影響受けると報告[29, 30]。FaviらはAuナノスフィア（61 nm）とAuナノスター（34 nm）をヒト皮膚線維芽細胞とラット脂肪パッド内皮細胞で評価[31]。両細胞でナノスフィア40 µg/mL、ナノスター400 µg/mLで致死濃度観察。ナノスフィア方がナノスターより毒性高いと報告、サイズ・形状・表面化学がAuNPs細胞毒性に影響と示唆。Woźniakらは多様形状AuNPsをHeLaとHEK293T（ヒト胚腎細胞）で評価[30]：ナノスフィア（~10 nm）、ナノフラワー（~370 nm）、ナノロッド（~41 nm）、ナノプリズム（~160 nm）、ナノスター（~240 nm）。興味深くナノスフィアとナノロッドがナノフラワー、ナノプリズム、ナノスターより毒性高い。小さなサイズと凝集プロセスがナノスフィア・ナノロッド毒性の主駆動力と説明。多く研究がAuNPsサイズ効果の細胞毒性検討[32, 33]。AuNPs小型化で細胞取り込み増加、細胞内濃度上昇で毒性増大。しかし低濃度でも高毒性示す例も[34]。細胞内AuNPs濃度は毒性影響するが、AuNPs特性理解も不可欠。Tarantolaらは2形状（ナノスフィア43 nm、ナノロッド38×17 nm）上皮細胞毒性評価[35]。ナノスフィア方がナノロッドより毒性高く、電気細胞基板インピーダンスセンシングで上皮細胞膜機能障害誘起確認[35]。前述通り多様形状AuNPs細胞毒性研究進行中。形状同一でも多因子が毒性影響。細胞毒性評価時、サイズ、形状、物理化学的表面特性、濃度、曝露時間、細胞種考慮必須[34, 36-38]。AuNPs特性以外に、細胞膜破壊、酸化ストレス、細胞骨格破壊、ミトコンドリア機能喪失など細胞毒性機構も重要[38, 39]。現在オートファジーとリソソーム機能不全がナノ材料毒性説明として浮上[40]。リソソーム内でナノ材料がリソソーム鉄媒介酸化ストレスとカテプシン等リソソーム加水分解酵素放出誘起、ミトコンドリア機能不全と細胞死導く。本報告ではナノロッドが4がん細胞種全てで最毒性。今後詳細細胞毒性メカニズム検討予定。

HepG2細胞での細胞取り込み

HepG2が4がん細胞種中最高細胞毒性示したため、細胞取り込み評価に選択。ICP-OESとLA-ICP-MSで細胞内Au濃度定量分析、結果図10示す。Au濃度5 µMで評価（4がん細胞種で無毒性濃度）。取り込み率：ナノスフィア（58.0%）＞ナノロッド（52.7%）＞ナノスター（41.5%）。前節で細胞毒性は形状依存（ナノロッド＞ナノスター＞ナノスフィア）示したが、細胞取り込み順序（ナノスフィア＞ナノロッド＞ナノスター）は細胞毒性順序と不一致。ナノスフィア取り込み最高だが毒性最低。高細胞取り込みが必ずしも高細胞毒性誘起せず。前述通りサイズ、形状、物理化学的表面特性、濃度、曝露時間、細胞種等多因子が細胞毒性影響。

3形状AuNPs取り込み度差（41.5–58.0%）は、熱力学的駆動力下でのラッピング（膜によるナノ粒子包み込み）と受容体拡散速度論の競合に依存可能性[41, 42]。ChithraniとChanがトランスフェリン修飾AuナノスフィアとAuナノロッドのHeLa細胞取り込み比較[42]。同サイズ（ナノスフィア直径＝ナノロッド幅）でナノスフィア取り込み優位。本報告ナノスフィア＞ナノロッド取り込みと整合。ナノロッド取り込みでは幅が長さより重要、アスペクト比増大で取り込み率低下[42]。ナノスターサイズ99.0±47.0 nmで3形状中最大。大型ナノ粒子（>50 nm）では受容体拡散速度論遅延でラッピング時間短縮[42]。したがって大型ナノ粒子取り込み低い、本報告ナノスターに該当。キトサンキャッピングでコロイド安定性と生体適合性向上図ったが、細胞表面受容体と相互作用しAuNPs取り込みに役割果たす可能性。詳細機構解明には更なる研究必要。

結論

ナノテクノロジー継続的発展には、抗がん剤など生理活性物質の薬物送達担体・ビークルとして成功応用のため、ナノ粒子の精緻な形状・サイズ設計が必要。緑茶抽出物をグリーン還元剤としてAuナノスフィアとナノスター合成。興味深くナノロッド細胞毒性がナノスフィアとナノスターより高く、ナノスフィアが4がん細胞種で最低細胞毒性。HepG2細胞取り込みは形状・サイズ依存の可能性大：ナノスフィア最高取り込み、ナノスター最低。サイズ・形状最適化と表面修飾・機能化でナノメディシン未来応用へのナノ粒子開発に繋がる。

略語

AFM

原子間力顕微鏡

AgNPs

銀ナノ粒子

AGS

ヒト胃腺癌細胞

AuNPs

金ナノ粒子

CTAB

セチルトリメチルアンモニウムブロミド

DLS

動的光散乱

DMEM

ダルベッコ改変イーグル培地

FBS

胎児牛血清

FT-IR

フーリエ変換赤外分光

HeLa

ヒト子宮頸上皮癌細胞

HepG2

ヒト肝細胞癌細胞

HR-TEM

高分解能透過型電子顕微鏡

HT29

ヒト大腸腺癌細胞

ICP-OES

誘導結合プラズマ発光分光分析

LA-ICP-MS

レーザーアブレーション誘導結合プラズマ質量分析

SEM

走査型電子顕微鏡

SPR

表面プラズモン共鳴