Fe(II)-タンニン酸被覆MOFによるアルテミシニン標的送達：三重陰性乳癌におけるフェロトーシス増強

概要

フェロトーシス誘導による腫瘍発育抑制は、細胞内酸化バランスに感受性の高い三重陰性乳癌（TNBC）に対する潜在的治療法となり得ます。近年、アルテミシニン（ART）およびその誘導体が、鉄媒介性エンドペルオキシド橋開裂によるフェロトーシス誘導を通じて、高悪性度がんの治療薬として研究されています。しかし、水溶性の悪さと細胞内鉄含量の限界により、抗腫瘍療法への更なる応用が困難です。本研究では、タンニン酸（TA）と二価鉄イオン（Fe(II)）でゼオライトイミダゾレートフレームワーク-8（ZIF-8）を被覆し、ARTを内包したナノキャリア（TA-Fe/ART@ZIF）を配位駆動自己組装により開発しました。薬物放出実験では、pH 7.4ではARTがほぼ放出されない一方、pH 5.0では10時間で59%放出され、優れたpH応答性放出を示しました。一方、細胞内ROSとMDAの高レベル上昇、GSHとGPX4の減少を伴う新規ナノ薬物システムが、顕著にフェロトーシスを増強することを示しました。単剤療法と比較して、in vitroおよびin vivo腫瘍抑制実験でTA-Fe/ART@ZIFのより高い腫瘍抑制効率を実証しました。本研究はフェロトーシスナノ医薬品の効力増強への新規アプローチとTNBC治療への新方向性を提供します。

はじめに

フェロトーシスは新たに発見された細胞死サブタイプであり、鉄依存性脂質ヒドロペルオキシド（LPO）の蓄積をもたらし、細胞構造と完全性を損傷します[1-3]。いくつかの低分子によるフェロトーシス活性化が、さまざまな実験的がんモデルで腫瘍抑制に効果的であり、フェロトーシスが新規抗がん療法としての可能性への高い期待を生んでいます[4-6]。三重陰性乳癌（TNBC）は、標的療法がなく、腫瘍再発、遠隔転移、治療抵抗性と関連する最も攻撃的な乳癌サブタイプです[7]。先行研究では、xCTシスチン/グルタミン酸対向輸送体が多数のTNBC細胞で高発現し、グルタチオン（GSH）レベルと酸化還元バランスの維持に重要な役割を果たすことが指摘されています[8]。細胞内GSH含量の低下はTNBC細胞をフェロトーシス感受性にし、腫瘍細胞を死滅させます[8]。特筆すべきは、フェロトーシスがTNBCの日常的なプログラムドアポトーシス抵抗性を回避できることです[9]。したがって、フェロトーシス誘導に基づく戦略や薬物は、難治性TNBCの臨床治療に治療可能性を有するかもしれません。

アルテミシニン（ART）は、ペルオキシド基を含むセスキテルペンラクトンで、伝統的中国植物「クソニンジン（Artemisia annua）」から単離され、複数のがん細胞株で望ましい抗腫瘍活性を示しています[10, 11]。増加する証拠が、がん細胞は正常細胞より有意に多くの細胞内鉄プールを含み、鉄媒介性エンドペルオキシド橋開裂によりARTが複数のがん細胞株で選択的に細胞死を引き起こすことを示しています[12, 13]。この鉄イオン依存性抗腫瘍活性は、ART制御フェロトーシスへの注目を集めています[13]。メカニズムとして、ARTはオートファジー非依存的にフェリチンのリソソーム分解を誘導し、細胞内二価鉄レベルを上昇させて細胞をフェロトーシス感受性にします[11]。

しかし、ARTがTNBCでフェロトーシスを誘導するかどうかは不明です。さらに、水溶性の悪さや細胞内二価鉄イオンの不十分な可用性など、一連の要因が抗腫瘍療法へのART応用を制限しています[13]。ARTナノ複合体は、ARTベース抗腫瘍薬の有望なナノ薬物送達システムとして期待されています[14-16]。近年、金属有機構造体（MOF）は、大きな細孔サイズ、高い見かけ表面積、小分子の選択的取り込み実証により注目されています[17-19]。MOF型材料の代表として、ゼオライトイミダゾレートフレームワーク（ZIF-8）は、pH応答性、高薬物担持、良好な生体適合性によりナノ医薬品開発で広く用いられています[20-23]。さらに、MOFに調整可能な表面を導入できることで、表面特性の制御と多機能化が可能です[24, 25]。MOF表面への金属-フェノール配位被膜の超分子組装は、刺激応答性分解、コロイド安定性、生体適合性など望ましい特性により近年注目されています[26, 27]。MOF上の金属-フェノール配位材料は、疎水性ART送達の理想的なベヒクルとなり得ます。

この着想に基づき、我々はTNBC細胞におけるフェロトーシス制御のため、ARTを内包したZIF-8ナノシステムを二価鉄イオン-タンニン酸配位被膜で被覆したTA-Fe/ART@ZIFを開発しました（図1参照）。ZIF-8は優れた生体適合性とpH応答性放出により、ART内包ナノキャリアとして選択しました。二価鉄イオン-TA配位被膜をART@ZIF表面に固定化し、分散安定性と二価鉄イオン（Fe(II)）供給を目的としました。調製ナノシステムの細胞内取り込み後、酸性分解によりART放出とFe(II)蓄積が促進されます。細胞内Fe(II)レベル上昇は、鉄媒介性エンドペルオキシド橋開裂によりARTをラジカルに分解し、フェロトーシス効果を著しく増強します。結論として、TA-Fe/ART@ZIF媒介フェロトーシスの発見は、TNBCに対する新規治療開発への新たな視点を提供する可能性があります。

材料と方法

試薬

アルテミシニン（99%）、2-メチルイミダゾール（98%）、硝酸亜鉛（ZnNO₃；98%）、タンニン酸（98%）、硫酸第一鉄（FeSO₄；98%）、無水メタノールをAladdin-Reagent Co. Ltd.（上海、中国）から購入しました。

TA-Fe/ART@ZIFナノ粒子の調製

ART@ZIFナノ粒子調製のため、ART 200 mgを無水メタノール1 mLに溶解し、2-メチルイミダゾール2 g（溶媒：無水メタノール8 mL）を徐々に添加しました。磁気撹拌下で硝酸亜鉛0.2 g（溶媒：無水メタノール1 mL）を徐々に添加。最終的に溶液量を15 mLに調整し、10分撹拌して淡白色溶液を得ました。10,000 rpmで遠心分離後、メタノールで3回洗浄。上清でART含量を測定し、沈殿を凍結乾燥して固体を得て今後の使用に供しました。

TA-Fe/ART@ZIFナノ粒子調製のため、TA溶液（脱イオン水中40 mg/mL、2 mL）をART@ZIF溶液（10 mg/mL、4 mL）に徐々に添加。20分撹拌後、硫酸第一鉄5 mg/mLを徐々に添加。さらに30分繰り返し撹拌し、暗紫色溶液を得ました。最終的に10,000 rpmで遠心分離し沈殿を回収。脱イオン水で3回洗浄後、凍結乾燥してTA-Fe/ART@ZIFを得て今後の使用に供しました。

特性評価

TEM（JEM-1230、JEOL、東京、日本）でナノ粒子の各部分の形態と元素組成を決定。動的光散乱とゼータ電位（DLS；Zetasizer Nano system、Malvern Instruments、Malvern、UK）で粒子サイズと電気的安定性を評価。フーリエ変換赤外分光法（VERTEX 70、Bruker、ブレーメン、ドイツ）と熱重量分析でナノ粒子構成成分の組成を分析。X線光電子分光法（XPS）測定をPHI 5000 Versa Probe III（Physical Electronics）で実施。TA-Fe/ART@ZIF材料の元素組成をEDX（Carl Zeiss Model: Neon-40）で実施。

内包効率と担持量測定

高速液体クロマトグラフィー（HPLC；Agilent 1200、Agilent Technologies、Santa Clara、CA）で上清中のART量を測定。薬物担持率と内包効率は以下で計算。

薬物担持率（%） = （NP内包実際薬物量 / NP量）× 100%

内包効率（%） = （NP内包実際薬物量 / 初期使用薬物量）× 100%

TA-Fe/ART@ZIFナノ粒子のin vitro放出とpH応答性

2 mgナノ粒子を包んだ処理済み透析膜を、pH 7.4と5.0のリン酸緩衝生理食塩水（PBS）50 mLにそれぞれ入れ、37℃で連続振盪。透析膜外側溶液を、実験開始後15分、30分、45分、1時間、2時間、4時間、6時間、8時間、10時間で採取。緩衝液中ART含量をHPLCで測定。

細胞培養

MDA-MB-231とL929細胞株をアメリカ型培養コレクション（ATCC、Manassas、VA、USA）から入手。37℃、5% CO₂、湿度条件下でRPMI-1640培地（Solarbio、北京、中国）、10%胎仔牛血清（Cyclone、Utah、USA）、100 µg/mLピルビン酸ナトリウム、ペニシリン、ストレプトマイシン（Solarbio北京、中国）を添加して培養。

in vitro細胞毒性試験

MTTアッセイ（3-(4,5-ジメチルチアゾール-2-イル)-2,5-ジフェニルテトラゾリウムブロミド）で文献手順[28, 29]に従い細胞生存率を測定。

MDA-MB-231細胞とL929細胞を標準培地で96ウェルプレート（5,000 cells/well）に播種し、5% CO₂、37℃で24時間培養。培地を除去し、PBSおよび異なる濃度のART、TA-Fe/ZIF、TA-Fe/ART@ZIF、デフェロキサミン（DFO、MedChemExpress、上海、中国）、N-ベンゾイルオキシカルボニル-Val-Ala-Asp(O-Me)フルオロメチルケトン（Z-VAD-FMK、MedChemExpress、上海、中国）、フェロスタチン-1（Fer1、MedChemExpress、上海、中国）を含む無血清培地100 µL/wellを添加。48時間後、MTT（5 mg/mL）10 µLを添加しさらに4時間培養。最後に自動酵素マーカー（BioTek Instruments Inc.、USA）で各ウェルの吸光度を測定。結果を細胞生存率百分率で表現。

カルセイン-AM染色アッセイ

MDA-MB-231細胞を24ウェルプレート（2×10⁴ cells/well）に播種し24時間培養。その後、異なる濃度のTA-Fe/ART@ZIFナノ粒子で24時間処理。培地除去後、暗所で4℃、20分間カルセイン-AM（Beyotime Biotechnology、上海、中国）で染色し、蛍光倒立顕微鏡（Olympus、東京、日本）で観察。

フローサイトメトリーによるアポトーシス検出

MDA-MB-231細胞を同条件で6ウェルプレート（2.5×10⁵ cells/well）に播種。PBS、ART、TA-Fe/ZIF、TA-Fe/ART@ZIFを24時間処理。その後、遠心分離で6ウェルプレートから細胞を回収。ヨウ化プロピジウムとAnnexin-V二重染色（Annexin V-FITC Kit、Beckman Coulter、マルセイユ、フランス）後、フローサイトメトリーで検出。

in vitro反応性酸素種（ROS）測定アッセイ

ROS含量をROS蛍光プローブ（ジクロロ-ジヒドロ-フルオレセインジアセテート（DCFH-DA）、Beyotime Biotechnology、上海、中国）で測定。MDA-MB-231細胞を6ウェルプレート（2.5×10⁵ cells/well）に播種し、5% CO₂、37℃で24時間培養。培地除去後、以下のように処理：ブランク対照群（無血清培地）、陽性対照群、実験群（異なる濃度ナノ粒子）。37℃で8時間培養後、各ウェルに0.1% DCFH-DAを添加し30分培養。DCFH-DAに非応答細胞をPBSで除去し、蛍光倒立顕微鏡（Olympus、東京、日本）で観察。

マロンジアルデヒド（MDA）とGSH含量測定

MDAアッセイキット（TBA法、Jiancheng Bioengineering、南京、中国）とGSHアッセイキット（Beyotime Biotechnology、上海、中国）で細胞内MDAとGSHレベルを測定。PBS、ART、TA-Fe/ZIF、TA-Fe/ART@ZIF処理後、MDA-MB-231細胞を回収・計数。キット添付指示に従い細胞内MDAとGSH含量を決定。

ウェスタンブロット解析

異なるナノ粒子処理したMDA-MB-231細胞をRIPA溶解緩衝液で溶解。タンパク質濃度決定後、10% SDS-PAGEゲルで電気泳動分離し、ニトロセルロース膜に転写。0.5% BSAタンパク質溶液で1時間ブロッキング後、一次抗体と4℃で24時間インキュベート。TBSTで一次抗体を洗浄後、二次抗体と室温で2時間インキュベート。二次抗体洗浄後、化学発光液でゲルイメージングシステム下観察。

in vivo抗腫瘍実験

すべての動物実験は濰坊医科大学倫理委員会承認。健康な雌ヌードマウス（4週齢、体重13-17 g、Vital River、北京、中国）に5×10⁶ MDA-MB-231細胞を150 µL PBSで接種。腫瘍体積が70-120 mm³に達したとき、マウスを4群に無作為分割。各群をPBS、ART（20 mg/kg）、TA-Fe/ZIF（80 mg/kg）、TA-Fe/ART@ZIF（100 mg/kg）で別々に処理。各マウスを3日ごとに腹腔投与。14日後、すべてのマウスを安楽死。腫瘍組織と重要臓器を回収し、ヘマトキシリン-エオシン染色実施。

統計解析

すべての実験を少なくとも3回繰り返し。SPSS version 22.0（IBM Corp.、Armonk、USA）で統計解析。結果を平均±標準偏差で表現。p < 0.05を統計的有意とする。

結果と考察

TA-Fe/ART@ZIFナノ粒子の特性評価

まず、文献手順[30]に従い、室温でメタノール、酢酸亜鉛、2-メチルイミダゾール、ARTからART@ZIFナノ粒子を合成しました。次に、TAと二価鉄イオンをボルテックス撹拌することで、安定した金属-ポリフェノール超分子膜がART@ZIFテンプレート周囲に迅速に形成されました。報告されている磁性ナノ粒子[31-33]と比較して、TA-Fe/ART@ZIFはMOF表面にTA-Fe膜を形成する自己組装法で調製され、過酷な化学反応や水熱反応を伴いません。より重要なのは、TA-Fe/ART@ZIFナノキャリアが低pHでトリガーされ、ARTとFe(II)を放出し、これがARTのエンドペルオキシドによってさらに触媒されてC中心フリーラジカルを生成し、フェロトーシスを著しく増強することです。最初の遠心分離上清をHPLCで測定した内包効率は66.7%でした。TA-Fe/ART@ZIFナノ粒子から得られた上清で、ARTの計算薬物担持量は11.4%でした。FTIR分光法（図2a）によると、ARTの特徴的吸収ピーク、すなわち1,738 cm⁻¹のカルボニル結合と724 cm⁻¹のペルオキシド橋[34]がTA-Fe/ART@ZIFナノ粒子で観察され、ARTがナノ粒子内に成功裏に内包されたことを示しています。次に、熱重量分析結果では、温度を約400℃まで上昇させるとARTが完全に消失しました（図2b）。TA-Fe/ZIFナノ粒子と比較して、ARTがTA-Fe/ART@ZIFナノ粒子総重量の7.1%を占めることが判明し、これはHPLC分析結果と基本的に一致します。

TEM結果では、ZIF-8とART@ZIFが類似の均一な六角形構造を示し、粒子サイズ分布は約100 nmで決定されました（図3a, b）。TA-Fe/ART@ZIFナノ粒子は球状構造で、粒子サイズ分布は150 nmでした。完全なART@ZIFと比較して、Fe(II)とTAで被覆されたTA-Fe/ART@ZIFは明確なコア-シェル構造を示し、TA-Fe膜厚は約30 nmでした（図3a）。さらに、形成ナノ粒子の領域元素マッピング解析を実施。領域元素マッピングで、TA-Fe/ART@ZIFナノ粒子の周辺がFe元素で囲まれていることが確認され、Fe(II)とTAが成功裏に被覆されたことを示しました（図3b）。XPS測定でTA-Fe/ART@ZIF複合体の表面元素組成と相互作用を調査。TA-Fe/ART@ZIFのワイドスキャンXPSスペクトルを追加ファイル1: Fig. 1sに示します。約285、408、531、737、1036 eVの主要ピークはそれぞれC 1s、N 1s、O 1s、Fe 2p、Zn 2pに関連し、TA-Fe/ART@ZIFナノコンポジット形成を実証しています。さらに、TA-Fe/ART@ZIFのEDSマッピング像を追加ファイル1: Fig. 2sに示します。炭素（C）、窒素（N）、酸素（O）、鉄（Fe）、亜鉛（Zn）などの元素に対応するピークが明確に見られ、XPSスペクトルと良好に一致します。Fe(II)量を増やすと、TA-Fe/ART@ZIFナノ粒子の動的直径が増加しました（追加ファイル1: Fig. 3s）。被覆をさらに確認するため、各種ナノ粒子のゼータ電位を測定。ART@ZIF粒子へのTA-Fe(II)層形成により、TAの酸性により表面ゼータ電位が+21 mVから-19.5 mVにシフトしました（追加ファイル1: Fig. 4s）。先行文献[30]によると、TA構造の豊富なポリフェノール基は基板被覆能力を付与するだけでなく、遷移金属イオン（Fe、Zn）と配位して金属-フェノール複合体を形成できます。Zn²⁺とHmimを混合して溶液を作ると、大量のZn²⁺イオンがART@ZIF粒子表面で配位するため、ART@ZIFのゼータ電位は+21 mVになります。TAのフェノール基（pKa 8.5）は脱プロトン化され負電荷を帯び、正電荷Zn²⁺と相互作用してART@ZIF表面でのTA-Fe膜成長を促進します。薬物送達ではキャリアの安定性が医療応用の重要因子です。ナノ粒子安定性はPBS中で1週間分散させることで実証。追加ファイル1: Fig. 5sに示すように、粒子サイズは研究期間を通じて望ましいサイズと安定性を示しました。

TA-Fe/ART@ZIFのin vitro放出と細胞毒性

次に、TA-Fe/ART@ZIFがpH応答性分解挙動を持つか調べるため、中性と酸性条件下でのナノ粒子からのART放出を検討しました。図4aに示すように、酸性条件下ではナノ粒子が1時間以内に約58%のARTを急速に放出しました。一方、中性条件下では微量のARTのみ緩やかに放出されました。さらに、透析膜外側外部溶液を水酸化ナトリウムで処理した際、pH 5.0群溶液が水酸化ナトリウムと反応してかなりの白色沈殿を生成しました。しかし、この現象はpH 7.4群では観察されませんでした。

我々の仮説では、この白色沈殿は酸性条件下でナノ粒子から亜鉛イオンとアルカリが解離して形成される水酸化亜鉛沈殿です。総じて、この証拠は我々のナノ粒子が酸性条件下で解離する能力を持つことを成功裏に示しています。

TA-Fe/ART@ZIFナノシステム設計では、TA-Fe(II)とZIF構造が腫瘍微小環境の酸性条件下でアブレートされ、内包ARTとFe(II)を放出します。細胞内Fe(II)レベル上昇は、鉄媒介性エンドペルオキシド橋開裂によりARTをラジカルに分解し、フェロトーシス効果を著しく増強します。したがって、MTTアッセイでナノシステムのMDA-MB-231細胞とL929細胞への細胞毒性を調べました。ARTと比較して、TA-Fe/ART@ZIFナノ粒子はMDA-MB-231細胞により高い細胞毒性を示しました（図4b）が、正常細胞への細胞毒性は低かったです（図4c）。TA-Fe/ART@ZIFナノ粒子はMDA-MB-231細胞活性を53.9%阻害しましたが、同濃度ARTではわずか24.1%阻害でした。カルセイン-AM染色実験結果も、TA-Fe/ART@ZIFナノ粒子濃度上昇に伴い生存MDA-MB-231細胞数が漸減することを確認しました（図4d）。

TA-Fe/ART@ZIFによるMDA-MB-231細胞でのROS生成増強

ARTは、鉄媒介性エンドペルオキシド橋開裂によるROS生成を通じて抗がん活性を発揮することが知られています[35, 36]。したがって、2',7'-ジクロロジヒドロフルオレセインジアセテート（DCHF-DA）プローブ[37]を用いて、TA-Fe/ART@ZIFのROS誘導効率を検討しました。図5に示すように、ARTとTA-Fe/ZIF処理群では未処理群と比較してわずかに強い蛍光信号が観察され、ARTとFe(II)イオンがROS生成を誘導できることを示しました。対照的に、TA-Fe/ART@ZIFナノ薬物曝露細胞では、ARTのFe(II)媒介性エンドペルオキシド開裂によって生成される望ましいROS収量の証拠として、強い蛍光信号が観察されました。細胞内での調製ナノシステム分解とFe(II)蓄積が、ROS生成を著しく増強しました。ARTとその誘導体の抗がん効果は、DNA損傷応答、リソソーム媒介性異化プロセス（マクロオートファジー）、酸化ストレスなど、さまざまな細胞プロセスを通じたアポトーシス誘導能力に帰属されています[13, 35, 38]。また、ARTの鉄媒介性エンドペルオキシド橋開裂が細胞内酸化バランスに影響し、多くのがん細胞タイプでフェロトーシスを誘導することも報告されています[11]。この酸化バランス崩壊ベースのフェロトーシス誘導は、Fe(II)添加でさらに増幅可能です。Fe(II)はARTを活性化するだけでなく、細胞内過酸化水素と反応してフェントン反応でヒドロキシルフリーラジカルを生成し、腫瘍細胞でのARTアポトーシス誘導効果を増強します。

TA-Fe/ART@ZIFによるMDA-MB-231細胞でのアポトーシスとフェロトーシス誘導

一方、細胞死とFe(II)の役割を調査するため、鉄キレート剤デフェロキサミン、アポトーシス阻害剤Z-VAD-FMK、フェロトーシス阻害剤フェロスタチン-1を用いて細胞救済を試みました。予想通り、Fe(II)スカベンジャーであるデフェロキサミンが細胞死を明確に阻害し、Fe(II)の重要な役割を示唆しました。さらに、MDA-MB-231細胞生存率は、アポトーシスとフェロトーシス阻害剤により31.4%からそれぞれ56.3%と76.0%に有意に改善されました（図6a）、これはTA-Fe/ART@ZIFナノ粒子媒介細胞死におけるアポトーシスとフェロトーシスの重要性を強調します。また、Annexin V-FITCベースアッセイによるフローサイトメトリーでアポトーシス度を定量的に決定。結果はTA-Fe/ART@ZIFナノ粒子がMDA-MB-231細胞の21.8%でアポトーシスを誘導することを示しました（追加ファイル1: Fig. 6s）。この割合はARTより高く、アポトーシスがTA-Fe/ART@ZIFナノ粒子媒介に関与するが主因ではないことを示唆します。

フェロトーシスの共通特徴は内因性脂質過酸化です[39]。脂質過酸化生成物であるMDA[40]を調べ、フェロトーシス程度を評価。結果はTA-Fe/ART@ZIFナノ粒子が対照群より約2.5倍高いMDAレベルを示しました（図6b）。これはナノキャリア濃縮Fe(II)とそれに伴う脂質ラジカルレベル上昇によるものと推定されます。細胞内主要抗酸化成分の一つであるGSHは、フェロトーシスに伴って減少します[41]。フェロトーシスにおけるGSHの重要な役割を考慮し、TA-Fe/ART@ZIFナノ粒子処理後の細胞内GSHレベルを評価。GSHはビークル処理細胞と比較して有意に減少しました（図6c）。これはTA-Fe/ART@ZIFナノ粒子によるFe(II)媒介性ART活性化を中心としたGSH枯渇と酸化バランス崩壊の強力な証拠となります。次に、TA-Fe/ART@ZIFナノ粒子のGPX4活性への影響を理解するためウェスタンブロット解析を実施[42]。TA-Fe/ART@ZIFナノ粒子がARTより顕著にGPX4活性を阻害することを観察しました（図6d）。これらのデータは最大限のGSH枯渇程度とも良好に一致します。

in vivo抗腫瘍実験

腫瘍保有ヌードマウスでの皮下移植腫瘍抑制により、MDA-MB-231細胞に対するナノ粒子の抗腫瘍効果をin vivoで評価。14日間治療中、他群と比較してTA-Fe/ART@ZIFナノ粒子がFe(II)-ART反応による豊富なROS生成の結果として、MDA-MB-231移植腫瘍増殖を有意に抑制しました（図7a）。また、すべての実験群で体重に有意差はありませんでした（図7b）、これはTA-Fe/ART@ZIFが無視できる副作用しか持たないことを示しています。治療効果をさらに研究するため、14日処理後、腫瘍と他正常組織をH&E染色で検査。図8に示すように、TA-Fe/ART@ZIFは腫瘍組織で最大の細胞死領域を引き起こしましたが、正常組織では明らかな損傷とアポトーシスはありませんでした。総じて、これらの結果はTA-Fe/ART@ZIF媒介療法が抗がん効果をもたらすだけでなく、SFT-MB媒介療法において低レベルの急性全身毒性を持つことを実証しました。

結論

要約すると、フェロトーシスは現在普及している療法の不可避的障壁を克服する独自の利点を持つため、TNBC治療の潜在的治療法となり得ます。ここでは、配位駆動自己組装により、ZIFナノ粒子上にTA-Fe(II)を被覆しARTを内包したART用二価鉄供給ナノキャリアを設計し、フェロトーシス増強を実現しました。ナノキャリアは弱酸性微小環境で溶解し、ARTとFe(II)を放出します。これがさらに細胞内ROSとMDAの高レベル上昇、GSHとGPX4減少を引き起こし、in vitroおよびin vivoで強力な腫瘍増殖抑制と抗がん効果を導きます。本研究はフェロトーシスナノ医薬品の効力増強への新規アプローチとTNBC治療への新方向性を提供します。TA-Fe/ART@ZIF誘導フェロトーシスの生体適合性と包括的メカニズムは、更なる調査のために確保されるべきです。